高春花为第一作者,汪俊云作为通讯作者,于2015年6月在《PLoS Negl Trop Dis》杂志发表了题为“Development of an Immunochromatographic Test for Diagnosis of Visceral Leishmaniasis Based on Detection of a Circulating Antigen”的论文。本研究以杜氏利什曼原虫前鞭毛体作为免疫原制备单克隆抗体,共获得了12 株能高效分泌特异抗体的细胞株,抗体亚类为IgG1或IgG2a,效价在1:25 600~1:204 800,其中2株杂交瘤分泌的抗体能唯一识别亲内脏利什曼原虫同一抗原。以此2株杂交瘤分泌的单克隆抗体制备的免疫层析试条检测213份确诊黑热病患者血清,204份为阳性,敏感性为95.8%;78份健康者血清均无假阳性反应;与麻风、疟疾和弓形虫病患者血清的交叉反应依次为3.2%(1/31)、2.33%(1/43)和3.7%(1/27);与30例囊型棘球蚴病和25例日本血吸虫病患者血清均无交叉反应,总特异性为98.7%(213/234),诊断效能为97.3%。本研究制备的试条与平行检测的商业化的检测黑热病患者血样中特异抗体的试条相比无论是敏感性还是特异性均无统计学差异,二者一致性很高(κ = 0.986±0.008; 95% CI: 0.970 to 1.000)。本研究制备的试条为实验室和现场诊断黑热病提供了方便、准确的工具,而且是以检测黑热病患者血清中循环抗原为基础,因此可用于黑热病患者的疗效考核和免疫功能缺陷病人的诊断。
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