多房棘球蚴病（Alveolar echinococcosis，AE），又称泡型包虫病，是由多房棘球绦虫（Echinococcus multilocularis）幼虫寄生引起的一种严重人畜共患寄生虫病，呈全球性分布，不仅严重威胁人类公共卫生安全，也给畜牧业经济带来重大损失。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术作为当前mRNA定量分析中的应用最广泛、技术最成熟的方法之一，已广泛应用于包虫病发病机制解析、药物靶点筛选及疗效评估等研究领域。然而，RT-qPCR检测结果的准确性高度依赖于在特定实验条件下稳定表达的内参基因；若内参基因选择不当，将直接导致目标基因表达量定量偏差，甚至得出错误结论。目前，针对多房棘球蚴感染状态下不同组织内参基因表达稳定性的系统性评价仍较为匮乏，制约了相关研究的精准性与可重复性。

  本研究构建了多房棘球蚴感染小鼠模型，系统采集感染组与健康对照组的肝脏、肺脏及脾脏组织样本，采用RT-qPCR技术对12个候选内参基因的表达稳定性进行全面评估。研究设计涵盖非分层（同一组织样本合并分析）与分层（按感染状态分组）两种分析策略，并综合应用NormFinder、geNorm、BestKeeper及Delta-Ct四种经典算法，对候选基因进行多维度稳定性排序与交叉验证，最终通过2-ΔΔCt法实现目标基因表达的精准标准化。该研究首次揭示，在多房棘球蚴感染背景下，最优内参基因具有明显的组织特异性：分层分析显示，Actb基因在肝脏和肺脏中表达最为稳定，而Rpl13a基因则在脾脏中稳定性最佳。基于此，本研究还分别针对肝、肺、脾三种组织推荐了经过验证的最优内参基因组合，为不同组织来源的样本检测提供了精准的内参选择方案。

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